Detail předmětu
Pokročilá fluorescenční spektroskopie
FCH-MC_PFSAk. rok: 2024/2025
Cílem předmětu je představit studentům různé fluorescenční techniky a jejich aplikaci s intepretací získaných výsledků. Student bude jev fluorescence představen od základu interakce světla a hmoty až po superrozlišené mikroskopické techniky. V rámci předmětu budou probírány tyto techniky: časově rozlišená emisní spektroskopie, anizotropie, rezonanční přenos energie, zhášení fluorescence, fluorescenční korelační spektroskopie, dvoubarevná fluorescenční křížově-korelační spektroskopie. U každé metody budou uvedeny praktické příklady, jejich výhody, omezení i způsoby interpretace.
Jazyk výuky
Počet kreditů
Garant předmětu
Zajišťuje ústav
Vstupní znalosti
Pravidla hodnocení a ukončení předmětu
Účast na přednáškách je nepovinná, doporučená.
Učební cíle
Absolvent tohoto předmětu bude rozumět základním pojmům z fluorescenční spektroskopie. Bude se orientovat v technikách stacionárních, časově rozlišených i mikroskopických. Budou mu poskytnuty praktické informace o způsobu měření a a analýze příslušných dat.
Základní literatura
Valeur B., Berberan-Santos M.N.: Molecular Fluorescence: Principles and Applications. Weinheim, Wiley‐VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, 2012 (CS)
Zařazení předmětu ve studijních plánech
- Program NKCP_CHCHTE magisterský navazující 2 ročník, zimní semestr, povinně volitelný
- Program NPCP_CHCHTE magisterský navazující 2 ročník, zimní semestr, povinně volitelný
Typ (způsob) výuky
Přednáška
Vyučující / Lektor
Osnova
- Rozptyl a absorpce záření – elektronové, vibrační a rotační přechody. Osud excitovaného stavu. Kinetika. Nelineární optické jevy.
- Solvatochromismus a ostatní efekty prostředí.
- Absorpční spektrofotometrie – uv-vis-ir, spektrofotometry a pokročilé techniky.
- Fluorescenční spektroskopie stacionární – fluorimetry, druhy spekter, kvantový výtěžek.
- Fluorescenční spektroskopie časově rozlišená – časová vs. frekvenční doména, instrumentace a principy.
- Mikroskopie – viditelná, fluorescenční, konfokální – principy a instrumentace.
- Fluorescenční korelační spektroskopie – autokorelační funkce, kros-korelační funkce, instrumentace, principy měření, modely.
-„Supermikroskopie“ – STED, dSTORM, PALM, PAINT atd. – principy a využití.
- Nejčastější chyby a omyly v měření.